Espèce de fourmi nichant profondément dans le sol.
Elle préfère les températures basses, y compris près du négatif, et n’est actif qu’à l’extérieur du nid durant l’hiver et au début du printemps
Prenolepis imparis entre dans un état d’hibernation pendant l’été.

Elle sécrète un liquide blanc opaque de son abdomen comme moyen de défense contre d’autres fourmis.